rnai引物设计网站-rtpcr引物设计网站
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简述信息一览：
RNAi所用的引物为什么要加T7启动子?
我不明白。Haha基因和启动子是分开考虑的。一个基因可以由不同的启动子来驱动，看看安装了什么样的启动子。
首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5→3方向不停的移动（这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动，见后），在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，引发体中许多蛋白因子的功能尚不清楚。
大约300-1000bp片段效果较好。干扰信使RNA当然不能用内含子了，还有序列不能有二级结构。
按需要在各种启动子的驱动下在生物体内表达，观察表型；同时可以根据该CDS序列，设计RNAi载体，转基因，观察表型。如果需要，可以克隆该基因本身的启动子，然后让其驱动该基因或RNAi片断表达。2 体外表达：可以利用大肠杆菌、酵母系统，在体外做一些原核或真核的表达。用以研究酶活，制备抗体等。
未知基因克隆与表达的研究途径
1、体外表达：可以利用大肠杆菌、酵母系统，在体外做一些原核或真核的表达。用以研究酶活，制备抗体等。
2、功能克隆的特点是用基因表达的产物蛋白质来克隆基因、虽然某一性状的编码基因是未 知的。如果对其生理生化及代谢途径研究的比较清楚，就可以分离和纯化控制该性状的蛋白质。因此功能克隆的关键是分离出一个纯度很高的蛋白质。只要有一个纯 的蛋白质，得到十分特异的探针，这一策略是行之有效的。
3、利用计算机来协助克隆的第一步是必须获得感兴趣的EST，在dbEST数据库中找出EST的最有途径是寻找同源序列，标准：长度≥100bp，同源性50%以上、85%以下。
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